每个人都曾试图在平淡的学习、工作和生活中写一篇文章。写作是培养人的观察、联想、想象、思维和记忆的重要手段。写范文的时候需要注意什么呢?有哪些格式需要注意呢?以下是小编为大家收集的优秀范文,欢迎大家分享阅读。
蛋白质等电点实验结果讨论 蛋白质等电点的测定实验小结篇一
1、上班前检查油窗机油是否正常,磨刀装紧,轮部注入1-2滴机油;
2、操作工除对机器进行必要的保养外,不得随意拆卸,必须保持机器完整;
3、操作时必须佩带专用的钢丝手套;
4、下班前必须清扫机器灰尘;
5、严禁他人随意操作。
放布机操作规程
1、上班前先检查机器各部分是否正常,并加注润滑油;
2、各传动部位不准有布条等缠绕物,发现有异物应及时消除;
3、中途离岗必须关掉电源;
4、下班前切断电源,清理检查灰尘方可下班。
粘合机的操作规程
1、检查各部位是否正常,输送带内是否有杂物,输送带是否清洁;
2、开启总电源,开启输送电源前,先把调速开关低于低速位,然后根据技术要求把速度调至适当速度,开启加温调节器,把温度调至所需温度;
3、开机前把压力调至最低,当温度达到温度后,把压力加至规定压力,开始工作,操作中经常注意输送带调编工作是否正常,严禁有产品卷入输送带内;
4、根据技术和检验要求,必要时对产品进行检验和实验,确认粘合结果合格后进行批量生产;
5、生产过程中必须保持输送带清洁,生产途中停电必须及时用手柄把产品从输送带中摇出,并使输送带运动一定时期进行冷却;
6、生产结束先停止加温,把压力调至最低,使输送带继续工作一定时间至输送带冷却后,对输送带进行清洁保养后,切断电源加上机罩。
精裁机的操作规程及保养
1、上班前先检查机器各部分是否正常,并加注润滑油;
2、操作时必须佩带规定的专用手套;
3、清扫机器必须切断电源后进行;
4、下班前必须关掉电源,并把机器罩好;
5、严禁操作工任意串岗操作。
电钻的操作规程及保养
1、上班前检查电钻有无异常响声;
2、操作工不得任意拆卸零部件,必须保持机器完整;
3、下班前必须清扫机器卫生,电源切断后方可下班;
4、严禁他人随意操作。
电加热裁布机的操作规程及保养
1、上班前检查机器各部位是否正常,并对机器进行必要的清洁;
2、在操作过程中发现异常应及时关机检查,自己不能解决的请机修工检查,确认正常后方可继续操作;
3、中途离岗必须关掉电源,更换电热丝必须在关机的状态进行;
4、严禁他人操作。
气泵的使用及保养
1、上班前必须排掉冷凝水,并检查油窗机油是否正常;
2、开机后检查声音有无异常,检查压力表是否标准;
3、下班前必须关掉电源,清理灰尘;
4、严禁他人操作。
大烫熨斗的使用及保养
1、上班前打开蒸汽进出阀门,并排出积水;
2、工作中发现异常应立即关掉进出阀门检查;
3、下班前将熨斗放在指定位置;
4、严禁他人随意操作。
烫台的使用和保养
1、上班前打开电源检查吸风电机有无异常响声;
2、检查烫台布是否完好;
3、下班前关闭电源并清理台面卫生;
4、严禁串岗操作。
大白扣使用及保养
1、上班前先检查机器各部分是否正常,并加入润滑油;
2、检查保险装置是否正常,使用前空踩机器检查;
3、下班前必须清扫机器卫生,电源切断后方可下班;
4、严禁他人随意操作。
蛋白质等电点实验结果讨论 蛋白质等电点的测定实验小结篇二
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等电点聚焦测蛋白质等电点 1.了解蛋白质的两性解离性质和等电点聚焦的原理; 2.学习测定蛋白质等电点的方法并掌握圆盘电泳技术。
二.实验原理 等电点聚焦(ief)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,ief 实质 就是在稳定的 ph 梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。
在电场中充有两性载体和抗对流介质,当加上电场后,由于两性载体移动的 结果,在两极之间逐步建立起稳定的 ph 梯度,当蛋白质分子或其它两性分子存 在于这样的 ph 梯度中时,这种分子便会由于其表面电荷在此电场中运动,并最 终到达一个使其表面静电荷为 0 的区带,这时的 ph 则是这种分子的 pl。聚焦在 等电点的分子也会不断地扩散。一旦偏离其等电点后,由于 ph 环境的改变,分 子又立即得到正电荷或负电荷,从而又向 pl 迁移。因此,这些分子总是处于不 断地扩散和抗扩散的平衡之中,在 pl 处得以“聚焦”。
三.实验步骤 1.凝胶制备 按表 1 的比例配制 4ml 工作胶液,在真空干燥器中抽气 10min。每组 4 管,每管 加胶液 1.8ml。混匀后立即注入到已准备好的凝胶管中,胶液加至离管顶部 1cm 处,在胶面上再覆盖 3mm 厚的水层,应注意不要让水破坏胶的表面,室温下放置 20〜30min 即可聚合。
表 1 凝胶工作液配比 凝胶母液(丙烯酰胺 30%甲叉双丙烯 酰胺 0.8%)
1ml 10%±硫酸铵 0.02ml 水 2.68ml 载体两性电解液 0.15ml 蛋白样品液 0.1ml,0.05ml temed 0.02ml 2.电泳 吸去凝胶柱表面上的水层,将凝胶管垂直固定于圆盘电泳槽中。于电泳槽下槽加 入0.2 %的 500ml 硫酸作正极;上槽加入 0.5 %的 800ml 乙醇胺作负极打开电源,/ 4
将电压恒定为 300v,因为聚焦过程是电阻不断加大的过程,故聚焦电泳过程中,电流将不断下降,降至稳定时,即表明聚焦已完成,继续电泳约 30min 后,停止 电泳,全程约需 3h。
3.剥胶 电泳结束后,取下凝胶管,用水洗去胶管两端的电极液,按照柱状电泳剥胶的方 法取出胶条,以胶条的正极为“头”,负极为“尾”,正极端呈酸性,负极端呈碱 性。剥离后,量出并记录凝胶的长度。
4.固定 取其中的凝胶条 3 根置于一个小培养皿内,倒入 10%放在三氯乙酸固定液中固定,约半小时后,即可看到胶条内蛋白质的白色沉淀带。
固定完毕,倒出固定液用直 尺量出胶条长度 l i 和正极端到蛋白质白色沉淀带中心,即聚焦部位的长度 l 2 o 梯度的测量 切段法:将未经固定的 1 根胶条,按照从正极端(酸性端)到负极端(碱性端)的顺 序切成相等的 10 段,按次放人有标号的、装有 0.0im 氯化钾的试管中,浸泡过 夜。然后用 ph 计测出每管浸泡液的 ph 并记录。
四•实验结果 1.凝胶条的长度及染色蛋白带的位置 凝胶条编号 1 2 3 4 固定前的长度 7.8cm 7.8cm 7.4cm 7.7cm l o
固定后的长度 7.7cm 7.8cm 7.4cm 未染色,测 ph l 1
梯度 蛋白带距酸端 1.3cm 1.4cm 1.3cm
距离 l 2
蛋白质距正极 1.32cm 1.4cm 1.3cm
实际长度 l s
梯度表及其相应标准曲线 标号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 长度 /cm 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 ph 值 3.05 3.72 5.04 6.76 7.24 7.99 8.62 9.58 10.1 4 10.1 8 / 4
蛋白质样品等电点的计算:
蛋白质聚焦部位距凝胶条正极端的实际长度 =固定后的蛋白区带中心距凝胶条正 极端的距离*固定前凝胶条长度/固定后凝胶条长度 则将上述数据代入 l f l 2 *
-l o,求出蛋白质距正极实际长度 l s 分别为 1.3cm、1.4cm、l i
1.3cm o 由凝胶条 1、2 和 3 及其相应蛋白带距离可计算出蛋白带距酸端的平均距 离:(1.3+1.4+1.32)/3=1.34 ②计算出蛋白质聚焦部位距凝胶条正极端的实际长度后,直接从 ph 梯度曲线上 求出该蛋白质等电点。
得出其标准公式为:y = 0.8372x + 2.6273 则待测蛋白质的等电点为 0.8372*1.34+2.6273=3.75 五•实验分析及讨论(1)实验结果测得的样品蛋白的等电点为 3.75,通过查常见蛋白质等电点参 考值表格可知,其为 b-卵黄脂磷蛋白。由于记录凝胶长度及蛋白质距正极的距 离存在读数误差,所以也可能是伴花生球蛋白(3.7-5.0)o(2)
等电点聚焦测蛋白质等电点分辨率高,可将等电点相差 0.01 — 0.02ph 单位 的蛋白质分开。不像一般电泳易受扩散作用影响,使区带越走越宽;聚焦电泳则 能抵消扩散作用,使区带越走越窄。同时,很稀的样品也可以聚焦而浓缩,实验 操作起来也简单方便。
(3)其存在其不足之处是在实验操作过程当中,读数的取值、样品溶液是否含 盐、在等电点时蛋白质是否溶解或变性,都会影响实验结果。因为盐会增大电流 量,产生热量;盐分子移至两极时,将产生酸或碱,中和两性电解质。由于这些 影响因素的存在,个人认为利用这一种方法还不足以鉴定出蛋白质种类。/ 4
附 常见蛋白质等电点参考值
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